Antiproliferatiivinen vaikutus on

Virtalähde

Kun tartunta tapahtuu ihmiskehossa, immuunireaktiot kehittyvät monimutkaisilla solu-vuorovaikutuksilla. Näiden vuorovaikutusten sääntelijät ovat erityisiä proteiinimolekyylejä - sytokiineja. Tähän mennessä on tutkittu yli 200 erilaista signalointimolekyyliä. Niiden erityispiirteitä ovat se, etteivät ne itse voi vaikuttaa vieraisiin antigeeneihin ja palvelevat yksinomaan tiedon siirtämistä solusta toiseen. Ilman sytokiinien osallistumista on mahdotonta kehittää normaalia immuunivastetta. Yksi keskeisistä sytokiineista on interferoni.

Interferonia on kolme tyyppiä: interferoni-alfa (INF-a), interferoni-beeta (INF-β), interferoni-gamma (INF-y). Kaikilla interferoneilla on viruslääkkeitä, immunomodulatorisia, kasvainten vastaisia ​​ja antiproliferatiivisia vaikutuksia. Yleisten ominaisuuksien lisäksi interferoneilla on useita eroja.

IFN-α ja IFN-β ovat samankaltaisia ​​toistensa kanssa. Heidän geenit sijaitsevat kromosomi 9: ssä. Sekä indusoitavan signaalin tuottamiseksi on viruksia. Heillä on voimakas antiviraalinen ja kasvainten vastainen vaikutus, vähemmän immunomodulatoriset ominaisuudet. INF-a: n tärkeimmät tuottajasolut ovat makrofageja, IFN-β - epiteelisolut, fibroblastit.

IFN-γ on voimakas immunomodulatorinen vaikutus yhdessä interleukiini-2: n (IL-2) ja tuumorinekroositekijän kanssa (TNF tai TNF) viittaa pääasialliseen proinflammatoriseen sytokiiniin, joka on solun immuniteetin indusoija. Antiviraaliset ja antitumoraaliset ominaisuudet ovat vähemmän voimakkaita kuin IFN-α ja IFN-β. geeni IFN-γ sijaitsee 12-kromosomissa, tuottajien tärkeimmät solut ovat T-lymfosyyttejä, luonnollisia tai luonnollisia tappajia (NK--solut). Indusoiva signaali tuotantoon voi olla mikä tahansa antigeeni tai muu sytokiini.

Interferonien antiviraalinen vaikutus on suppressoida viruksen RNA: n synteesi, tukahduttaa viruksen proteiinin verhokäyrän synteesi. Tämän vaikutuksen mekanismi on solunsisäisten entsyymien, kuten proteiinikinaasin tai adenylaattisyntetaasin aktivoituminen. Proteiinikinaasi tuhoaa proteiinisynteesin aloituskerroksen matriisi-RNA: lla, joka suppressoi proteiinisynteesiä. Adenylaattisyntetaasi - synnyttää aineet, jotka tuhoavat viruksen RNA: n.

Interferonien immunomodulatorinen vaikutus - kyky säätää immuunivasteen mukana olevien solujen vuorovaikutusta. Interferonit suorittaa tämän toiminnon säätämällä solujen herkkyys sytokiinien ja ilmentymisen solukalvojen molekyylien major histocompatibility complex (tyyppi I GKG1). Vahvistaminen GKG1 ilme viruksen infektoimia soluja merkittävästi lisää todennäköisyyttä, että ne tunnistavat immuunisolujen kehosta ja eleminirovany. Selvin immunomodulatorisia ominaisuuksia on IFN-γ, joka on tuote T-lymfosyyttien auttaja I kirjoittaa sen yhdessä muiden proinflammatoristen sytokiinien aktivoivat makrofageja, sytotoksiset T-lymfosyytit, luonnolliset tappajasolut (NK-solut), inhiboivat B-lymfosyyttien aktivoi prostaglandiini ja kortikosteroidijärjestelmä. Kaikki nämä tekijät parantaa fagosyyttisolujen ja sytotoksisen vasteen tulehduksellisen esiintymävyöhykkeellä ja edistää tehokasta poistamista tarttuvan aineen.

Interferonien antitumoraalinen vaikutus liittyy niiden kykyyn hidastaa tai estää soluviljelmän kasvua ja aktivoida immuunijärjestelmän kasvainten vastaiset mekanismit. Interferonien tämä ominaisuus löydettiin kauan sitten ja sitä käytetään laajalti terapeuttisiin tarkoituksiin. Kaikki interferonien antituumoriset vaikutukset jakautuvat suoraan ja epäsuoraan. Suorat viivat liittyvät siihen kykyyn vaikuttaa suoraan kasvainsoluihin, niiden kasvuun ja erilaistumiseen. Epäsuorat liittyvät immunokompetenteiden solujen kyvyn parantamiseen kehon epätyypillisten solujen havaitsemiseksi ja tuhoamiseksi.

Interferonin suorat antituumoriset vaikutukset:

  • RNA-synteesin poistaminen.
  • Proteiinisynteesin vaimennus.
  • Erottamattomien solujen stimulaatio kypsymiseen.
  • Kasvainsolumembraanantigeenien ja hormonireseptorien ekspressio lisääntyy.
  • Vasogeneesin prosessien rikkominen.
  • Onkovirusten neutralisaatio.
  • Tuumorin kasvutekijöiden vaikutuksen suppressio.

Interferonin epäsuorat antitumoraaliset vaikutukset:

  • Immuunijärjestelmän solujen aktiivisuuden stimulointi (makrofagit, NK-solut, T-sytotoksiset lymfosyytit).
  • Ilmentymisen tehostaminen ensimmäisen luokan histokompatibiliteettimolekyylien soluihin.

Interferonien antiproliferatiivinen vaikutus on Interferonien kyky osoittaa sytostaattinen ominaisuudet - inhiboimaan solujen kasvua estämällä RNA: n synteesin ja proteiinien, kuten myös esto kasvutekijöiden stimuloivan solujen lisääntymistä.

Glukokortikoidit (antiproliferatiivinen vaikutus)

Antiproliferatiivisia vaikutuksia glukokortikoidien liittyy rajallinen kosketukseen monosyyttien tulehduksessa ja esto tulisija jakamalla fibroblastien sekä hormonit, sekä vähentää niiden stimuloiva vaikutus histamiinin, serotoniinin, kiniinit, joiden muodostuminen vähenee mainittujen steroideja.

Lisäksi glukokortikoidit estävät synteesi mukopolysakkaridien ja siten rajoittaa veden sitoutuminen kudoksissa ja plasmassa Br Cove kiinni yhdessä haavaeritettä tulisija nivelreuman tulehduksen. Tämä vähentää turvotusta ja, mikä tärkeintä, kehittäminen nivelreuman tulehduksen fibrinoidista faasi ja sitten hyalinoosi.

Seurauksena, estää tai merkittävästi vähentää häiriöitä rakenteen sydänläpät, sydänlihaksen, verisuonia ja niin edelleen. Eniten kehittyy hyvä vaikutus, kun sitä käytetään yhdessä kortikosteroidien steroideihin kuulumattomien tulehduskipulääkkeiden.

Käytetään glukokortikoideja ja korvata niiden puute elimistössä ja sääntelemättä heikentyneisiin toimintoihin.

Jotta voidaan korjata puute glukokortikoidihormonien, kun sitä käytetään ensisijaisena lisämunuaisen vajaatoiminta (Addisonin tauti, verenvuoto lisämunuaisen kuoren sepsis, syntymä vamma, hypoksia), tunnettu siitä vajaatoiminta ja gluko- ja mineralocorticoids, ja sekundaarinen lisämunuaisen vajaatoiminta (hypopituitarismi, hypotalamus esto järjestelmä - aivolisäke - lisämunuaisen kuorikerroksen koska pitkäaikainen käyttö glukokortikoidien), tunnettu siitä, että puutos glukokortikoidien vain.

"Pediatric Pharmacology", IVMarkova

Kortikosteroidit joka toinen päivä voi estää tai vähentää esto on hypotalamuksen - aivolisäkkeen - lisämunuaisen kuoren ja tukahduttaminen epäspesifisten infektioiden vastustuskykyä. J. Melby (1977) lueteli ne merkinnät, joissa glukokortikoideja voidaan määrätä useimmilla potilailla joka toinen päivä sekä sairauksia, joissa tämä on mahdotonta. Voit käyttää glukokortikoideja joka toinen päivä seuraavien sairauksien kanssa: keuhkoputkien...

Kun kortikosteroideja valitaan tapauksissa, joissa ei tarvita hätäterapiaa, on suositeltavaa ottaa huomioon päivittäinen rytmihäiriöiden endogeenisten hormonien eritystä. Hoidon alussa eniten (tyypillisesti 2/3) annoksesta annetaan aamulla tuntia 7-8, lepo - iltapäivällä tuntia 13 - 14. Kun jakamalla päivittäinen annos annetaan kolme annosta 7, 10...

Luontainen mineralokortikoidi, aldosteroni, tuottaa lisämunuaisen aivokuoren glomerulaarikuoren; Tätä prosessia säätelee angiotensiini II, joka muodostuu reninin vaikutuksesta. Lääkkeinä käytetään deoksikortikosteroniasetaattia (DOXA) ja DOX-trimetyyliasetaattia. Käyttöaiheet. Levitä mineraalikortikoidit suoliston toksioosi yhdessä infuusioterapian kanssa. Niitä käytetään myös äkilliseen hypotensioon, joka liittyy natriumin ja veden menetykseen (mutta...

Indikaatiot pitkäaikainen käyttö suurina annoksina glukokortikoidien. Niitä käytetään muutaman viikon tai jopa kuukausia autoimmuunisairauksien anemia, trombosytopeeninen purppura, jotkut munuaistulehdus, haavainen paksusuolen tulehdus, sarkoidoosi, akuutti leukemia, yleistynyt Hodgkinin tauti, ei reumaa sydäntulehduksen, joskus vaikea astma. Useimmissa tapauksissa, terapeuttinen vaikutus riippuu tukahduttaminen Sytolyysin reaktioita, erityisesti allerginen synty....

Anaboliset steroidit: methandrostenolone (Dianabol, Nerobolum) metilandrostendiol (Methandriol) fenobolin (Durabolin, Nerobolum) retabolil - tuottama aine syn teesin miessukupuolihormonien (androgeenien). Androgeenit annetaan kaksi eri syystä: androgeeni (.. Eli kehittämisen edistämiseksi toisen seksuaalista ominaisuudet) ja anaboliset. Anaboliset steroidit ovat erilaisia ​​rakenteesta androgeenien ja niiden androgeenisia ominaisuuksia pienenee dramaattisesti (100 tai enemmän)....

Antiproliferatiiviset lääkkeet - Luettelo lääkkeistä ja lääkkeistä

Farmakologisen vaikutuksen kuvaus

Antiproliferatiivinen vaikutus pyrkii estämään eri solujen liiallisen lisääntymisen. Toimintamekanismi on erilainen ja riippuu erityisestä valmistuksesta ja solutyypistä, joihin tämä toiminta kohdistuu. Erityisesti tämän vaikutuksen mekanismia ei voi liittyä sellaisten moduloivan vaikutuksen synteesin tiettyjen onkogeenien, mikä johtaa normalisoitumista neoplastisen solun transformaation ja kasvaimen kasvun inhibitiota. Tai vaikutusmekanismi voi perustua fibroblastien proliferaation estämiseen, jota stimuloivat fibroblastien pääasiallinen kasvutekijä. Lääkkeitä, joilla on antiproliferatiivinen vaikutus, käytetään erilaisten syöpien, eturauhasen adenoman, erilaisten kroonisten ihosairauksien (esim. Psoriaasin) hoitoon ja ennaltaehkäisyyn.

Huumeiden etsintä

Valmisteet farmakologisella vaikutuksella "Antiproliferatiivinen"

  • Avonex (injektioneste, liuos, lyofilisoitu)
  • Avonex (liuos intramuskulaariselle injektiona)
  • Adenostop (konsentraatti liuosta varten oraaliseen antamiseen)
  • Altevir (injektioneste, liuos)
  • Alfaferon (injektioneste, liuos)
  • Arava (suun kautta otettavat tabletit)
  • B
  • Beloderm (kerma ulkoiseen käyttöön)
  • Beloderm (voide ulkoiseen käyttöön)
  • D
  • Genferoni (peräpuikko)
  • Genferon Light (Spray nenää)
  • D
  • Dilatrend (oraaliset tabletit)
  • L
  • Leflunomidi (aine-jauhe)
  • Leflunomidi (tabletit ovat oraalisia)
  • P
  • Permixon (kapseli)
  • P
  • Realdiron (lyofilisaatti liuoksen valmistamiseksi subkutaaniseen antoon)
  • Ronbetal (liuos ihon alle)
  • T
  • Tadenan (kapseli)
  • Tyqveol (öljy oraaliseen antamiseen)
  • Tyqveol (peräpuikko)
  • Tyqveol (kapseli)

Huomio! Tässä lääkitysoppaassa annetut tiedot on tarkoitettu lääketieteen ammattilaisille, eivätkä ne saa olla perusta itsehoitoa varten. Lääkkeiden kuvaukset annetaan viitteellisiksi eikä niitä ole tarkoitettu hoitojen määräämiseen ilman lääkärin osallistumista. On vasta-aiheita. Potilaat tarvitsevat erikoistuneita neuvoja!

Jos olet kiinnostunut enää antiproliferatiivisia aineita ja huumeiden niiden kuvaukset ja käyttöohjeet, synonyymejä ja analogit, tietoa koostumuksesta ja irrotusmuoto, merkintöjen ja sivuvaikutukset, käyttömenetelmät annostuksen ja vasta, muistiinpanoja hoito lasten lääketiede vastasyntyneille ja raskaana oleville naisille, lääkkeitä koskevasta hinnasta ja arvioinneista tai sinulla on muita kysymyksiä ja ehdotuksia - kirjoita meille, ehdottomasti yritämme auttaa sinua.

antiproliferatiivisia

Antiproliferatiivinen vaikutus pyrkii estämään eri solujen liiallisen lisääntymisen.

Toimintamekanismi on erilainen ja riippuu erityisestä valmistuksesta ja solutyypistä, joihin tämä toiminta kohdistuu. Erityisesti tämän vaikutuksen mekanismia ei voi liittyä sellaisten moduloivan vaikutuksen synteesin tiettyjen onkogeenien, mikä johtaa normalisoitumista neoplastisen solun transformaation ja kasvaimen kasvun inhibitiota. Tai vaikutusmekanismi voi perustua fibroblastien proliferaation estämiseen, jota stimuloivat fibroblastien pääasiallinen kasvutekijä.

Lääkkeitä, joilla on antiproliferatiivinen vaikutus, käytetään erilaisten syöpien, eturauhasen adenoman, erilaisten kroonisten ihosairauksien (esim. Psoriaasin) hoitoon ja ennaltaehkäisyyn.

Antiproliferatiivinen aine

Keksintö koskee lääketeollisuutta, erityisesti luonnollisesti esiintyvää ainetta, jolla on antiproliferatiivinen aktiivisuus. Tarkoittaa, antiproliferatiivista aktiivisuutta, joka on proteiini, uute Toxocara canis, joka on saatu uuttamalla gomogentata loismatoja T. Canis fosfaatilla puskuroitua suolaliuosta, pH 7,2 suhteessa 1:10 ja 36-48 tunnin ajan 4 ° C: ssa, sentrifugoimalla. Edellä kuvatulla aineella on voimakas antiproliferatiivinen aktiivisuus. 1 z.s. f-ly, 1 tabl., 2 pr.

Keksintö koskee lääketieteen ja eläinlääketieteen alaa, erityisesti uutta luonnollista alkuperää olevaa ainetta, jolla on antiproliferatiivinen vaikutus.

Moderni lääketieteessä on melko laaja kemoterapeuttisten kasvainten lääkeaineiden arsenaali. Pohjimmiltaan kemoterapia tarkoittaa ryhmää, jota edustaa antineoplastiset alkyloivat aineet, antimetaboliitit, syövänvastainen antibiootit, syövän vastaisia ​​hormonaaliset aineet, immunomodulaattorit, ja jotkut muut eri vaikutusmekanismi. Useimmat näistä syöpälääkkeitä ovat erittäin myrkyllisiä, ja siksi, piirit ja kesto kemoterapia on valittu siten, että sivuvaikutuksia, joka vaikuttaa käsittelyn tehoa kokonaisuutena.

Tunnettu luonnollinen syöpälääkkeitä kasviperäistä (vinka-alkaloidit (vinkristiini); alkaloidit marjakuusesta (taksaanit) (paklitakseli, dosetakseli), podofyllotoksiinista kohdennettu podofilla kilpirauhasen (Etoposidi, teniposidi) ja alkaloidit Colchicum speciosum (demekoltsin (kolhamin), kolkisiini )) ja bakteeri- alkuperää (rubromitsin et ai.), joka myös on rajoitettu käyttö johtuen suuren myrkyllisyyden ja kapea terapeuttinen kirjo (hoidettaessa tiettyjä raznovidnos s kasvain, edullisesti eksofyyttinen kasvu).

Siksi tarvitaan uusia, erittäin tehokkaita, luonnollista alkuperää olevia, kasvaimia estäviä lääkkeitä, joilla olisi laaja kirjo toimintaa ja jotka olisivat vähemmän myrkyllisiä.

Helvetit ovat yleinen nimi loistaville matoille, jotka elävät ihmiskehoon, muihin eläimiin ja kasveihin, jotka aiheuttavat helmintiasioita.

Helmistoissa ovat esimerkiksi tapeworms, cestodes, trematodes tai trematodes (molemmat näistä ryhmistä kuuluvat flatworms) ja pyöreät linnut tai nematodit.

Viimeksi mainittuihin kuuluvat Toksokary (etenkin Toxocara canis). T. canis edustaa nematodia loistaen suoliston lihansyöjiä, esimerkiksi koiria; Inkossi kutsutaan toksokariasiksi.

Parasiteetin aikana helminit tuottavat ja vapauttavat erilaisia ​​aineenvaihduntatuotteita. Eläinlääkkeiden elintärkeän aktiivisuuden sekretoriset tuotteet ovat isäntäorganismille luonnollisia aineita sen fysiologisissa prosesseissa.

On tunnettua, että aiheuttajia invasions voi olla moduloiva vaikutus aikana monien sairauksien hyvin erilaisia ​​etiologialtaan, mukaan lukien pahanlaatuiset (esim., Vasilev S. et ai. (2015). Erityisesti on raportoitu, että hiirillä, jotka on infektoitu sukkulamadon spiralis ( toisto trikinoosia) johtaa suppression pahanlaatuisten solujen kasvua ja lisäämään eloonjäämisaste eläinten siirrostuksen jälkeen melanoomasolujen B-16 olosuhteissa in vivo (Molinari jA, Ebersole JL, 1977, Pocock D., Meerovitch E., 1982; Kang YL et ai, 2013. ) Tiedot myös T. spira -metabolian tuotteiden testauksesta lis kanssa estävä vaikutus kasvuun ja eloonjääminen kasvainsolujen olosuhteissa in vitro (Vasilev S. et ai, 2015 ;. Wang X.L. et ai, 2009 ;. Wang X.L. et ai, 2013).

T. caniksen antituumorisen aktiivisuuden arvioimista tai näiden helmintien metabolian tuotteista ei ole aiemmin tehty tutkimuksia.

Keksinnön tavoitteena on saada aikaan T. canis-kudosten proteiiniuutteita arvioimaan niiden antiproliferatiivista vaikutusta erilaisten linjojen tuumorisolujen malleihin ja varmistamaan niiden mahdollinen soveltaminen tulevaisuudessa tehokkaana kasvaimenvastaisena aineena.

Keksinnön yhteenveto on se, että aine, jolla on antiproliferatiivista aktiivisuutta, on helmintejä, erityisesti Toxocara canis -uutetta sisältävä proteiiniuuti. On huomattava, että saamisen edellytykset ote homogenaatin loismatojen, mukaan lukien T. canis, riippuvat biologisen materiaalin, ja olennaiset piirteet valmistamiseksi Proteiiniuutteiden on uutto fosfaattipuskuroidulla suolaliuoksella, pH = 7,2.

Uutolla on voimakas antiproliferatiivinen ja sytostaattinen vaikutus ihmisen kasvainsolujen malleihin in vitro. Kuten edellä mainittiin, toxocar-uute ei ollut aikaisemmin testattu ihmisen kasvainsolujen malleissa in vitro.

Luonnon alkuperän vuoksi ehdotettu antiproliferatiivinen aine voi olla vähemmän myrkyllinen läsnä ollessa laaja toimintahäiriön korkea kasvaintenvastainen tehokkuus.

Esimerkkejä erityisestä suorituskyvystä

Esimerkki 1 T. canis -proteiiniuutteen valmistaminen.

Oletettavana antiproliferatiivisena aktiivisuutena käytettiin kypsän T. canis-proteiinin uutetta, joka oli aiemmin puhdistettu pienimolekyylipainoisista yhdisteistä.

Huuhdottiin perusteellisesti tislatulla vedellä ja sitten suolaliuoksella jäädytetty kypsä matoja - Toxocara canis hajotettiin sakset, homogenointi on posliini laasti, joka on sijoitettu astiaan, jossa on jäätä. Homogenoinnin aikana saatu biomateriaalin toistettiin (3-5 kertaa) jäädytys ja sulatus samanaikaisesti hionta täydellinen tuhoutuminen rakenteen raaka-aineen homogeenisen massan. Uuttoaineena proteiineja T. canis Saatua homogenaattia käytettiin fosfaattipuskuroitua suolaliuosta, pH 7,2, joka valmistettiin resepti (natriumkloridia - 8,5 g dinatriumfosfaattia - 1,15 g; kaliumdivetyfosfaatti - 0, 2 g 1 litrassa tislattua vettä) suhteessa 1:10. Uuttaminen suoritettiin jäähdytysosastossa + 4 ° C: ssa 48 tuntia jatkuvasti sekoittaen magneettisekoittajalla. Uuttamisen jälkeen kerran biomateriaalin saatu sentrifugoitiin 15000 rpm / min 20 minuuttia jäähdytetyssä sentrifugissa Optima TLX (pöytäsentrifuugissa kontrolloi mikroprosessori Becman Coulter Herneshal, S.A.). Saatu proteiini sentrifugoinnin jälkeen T. Canis vapautettiin alhaisen molekyylipainon proteiineja, dialyysillä fosfaattipuskuroitua suolaliuosta, laimennettiin tislatulla vedellä suhteessa 1:10.

Saatu proteiiniuute varastoitiin -20 ° C: ssa. Polyakryyliamidigeelielektroforeesin menetelmän avulla määritettiin, että T. caniksen proteiiniseos sisältää enemmän kuin 20 eri elektroforeettisen liikkuvuuden ja molekyylipainon proteiinifraktioita.

Esimerkki 2. T. canin -proteiiniuutteen vaikutuksen arviointi ihmisen rintasyöpäsolujen (MCF-7) ja ihmisen paksusuolen (Caco-2) viljelmissä, riippuen uutteen konsentraatiosta.

Tämän kokeen tarkoituksena oli arvioida T. caniksen proteiini-uutteen vaikutusta ihmisen tuumorisolujen proliferaatioon kahdella viivalla.

Materiaalit ja menetelmät

Kohdekennot. MCF-7 (ihmisen rinta- adenokarsinooma), ja Caco-2 (ihmisen paksusuolen adenokarsinooma): Kahden epiteelin solulinjoja käytettiin. Solut, jotka olivat koeajan asettamisjakson ulkopuolella, varastoitiin nestetyppiin. Ennen tutkimuksia ampullit solut sulatettiin ja niitä viljeltiin tavallisilla menetelmillä viljelypulloihin (CORNING, pullo, 25 cm 2, USA) kasvun DMEM GlutaMAX (Gibco), jota oli täydennetty 10% FBS: ää ja antibioottia / antimykoottia (Gibco, x 100) korkeat kosteusolosuhteet2-inkubaattorissa (New Brunswick, Galaxy 170R) T = 37 ° C: ssa 5% CO: n ilmakehässä2.

Testi proteiiniuute. Tutkittu T. canis -proteiiniuute (valmiste on esimerkissä 1) on uutetta fosfaattipuskuroidussa suolaliuoksessa, ei steriiliä. Proteiinikonsentraatio varastoliuoksessa oli 10,9 mg / ml. Ennen tutkimusta liuos varastoitiin -70 ° C: ssa.

Ennen töitä, putki, jossa proteiiniuute sulatettiin huoneenlämpötilassa. In vitro -kokeessa proteiiniuutetta testattiin seuraavilla proteiinipitoisuuksilla: 12,5, 25, 50, 100, 250, 500, 1 ja 2 mg / ml. Laimennosten valmistamiseksi käytettiin kasvualustaa DMEM GlutaMAX (DGIBCO), jossa oli 2% FBS ja antibiootti.

Ennen koetta valmistettiin 0,25 μl: n millipore-suodattimen läpi steriloimisen jälkeen 2 kg / ml konsentraatiota sisältävä työliuos, valmistettiin T. canis -uutteen laimennokset: 1, 500, 250, 100, 50, 25 ja 12,5 μg / ml käyttämällä DMEM GlutaMAX -kasvatusalustaa (DGIBCO), jossa oli 2% FBS ja antibiootti.

Kokeilua, MCF-7-solut ja Caco-2-inkuboitiin vakiomenetelmien mukaisesti, jolloin saatiin subkonfluentnogo yksikerroksen. Aktiivisessa kasvuvaiheessa yksisolukerros dispergoitiin trypsiini / verseeniä tuloksena saadut solut suspensoitiin uudelleen DMEM GlutaMAX (Gibco), jossa oli 10% FBS: ää ja antibiootti standardin konsentraatio. Juuri valmistettua solususpensiota maljattiin 24-kuoppaisille levyille (SARSTEDT, Saksa) 35 x 10 3 solua kuoppaa kohti MCF-7-solut ja 30 x 10 3 solua kuoppaa kohti Caco-2-solut. Tämän jälkeen levyt laitettiin CO: ksi2-inkubaattoria 3 tuntia kunnes täydellinen solujen leviäminen. Sitten kuopasta poistettiin väliaine, johon oli kiinnitetty solut, ja kasvatusliuos lisättiin koekuoppiin tutkittavan aineen pitoisuuksilla (4 toistetaan jokaista testattavaa konsentraatiota kohti). Kontrollina jätettiin neljä kuoppaa soluilla, joita viljeltiin täydellisessä kasvualustassa 2% FBS: llä ilman testiainetta. Kasvualustan lopullinen tilavuus kontrolli- ja koeryhmissä oli 500 pl / kuoppa.

Kokeessa suoritettiin solujen päivittäinen valo-optinen havainnointi käyttämällä käänteistä mikroskooppia Olympus CK 40 (Japani), arvioimalla solujen morfologian muutosten läsnäolo tai poissaolo koehakaivoissa verrattuna kontrollista. Tuumorisolujen proliferatiivinen vastaus tutkitun T. canis -uutteen vaikutukseen arvioitiin muodostuneen yksikerroksen tiheydellä ja elinkykyisyydellä solujen 96 tunnin inkuboinnin jälkeen tutkittavan uutteen läsnä ollessa.

Solujen elinkelpoisuus määritettiin käyttäen tavanomaista menetelmää solujen laskemiseksi Goryaev-kammiossa, jossa solususpensio alustava värjäys trypaanisin liuoksella. Tätä varten yksikerroslevy hajotettiin trypsiini / versene-liuoksella, solut suspendoitiin uudelleen kasvualustalle ja saatu solususpensio värjättiin 0,4% Trypan Blue -liuoksella (SIGMA). Tämän jälkeen solut laskettiin Goryaevin soluun. Tätä tarkoitusta varten kussakin kuopassa laskettiin solujen kokonaismäärä (kokonaismäärä) ja värjättyjen (elinkelvottomien) solujen lukumäärä.

% elinkykyisistä soluista (nhyvin) laskettiin kaavalla

jossa NT - solujen kokonaismäärä (kokonaismäärä) kuopassa;

Nnoin - värjätyt (ei-elinkelpoiset) solujen lukumäärä kuopassa.

Tutkimuksen kohteena olevan T. canis -seoksen vaikutusta MCF-7: n ja Caco-2-kasvainsolujen proliferatiiviseen aktiivisuuteen arvioitiin 96 tunnin kuluttua vertaamalla koekappojen solujen kokonaismäärää kontrollin suhteen.

Kokeen aikana vaikutuksen arvioimiseksi testin uutetta T. canis osoitettuja pitoisuuksia epiteeli- viljelmiä ihmisen rintasyöpäsolujen (MCF-7) ja ihmisen koolonin (Caco-2) suoritettiin päivittäin visuaalinen luonteeseen kontrollia kasvun ja morfologia kasvavista pesäkkeistä soluja. 24 ja 48 tuntia kaikissa koekaivoja kanssa MCF-7 ja Caco-2-tiheys pesäkkeiden on verrattavissa kontrolliin. Morfologisia muutoksia ei havaittu. Detrit oli täysin poissa.

72 tunnin kuluttua MCF-7- ja Caco-2-soluissa 2 mg / ml pitoisuutena havaittiin havaittavissa olevan kasvun viive. Todettiin, että kokeellisissa kuopissa 2 mg / ml pikkukoko oli pienempi kuin kontrolliryhmässä; Myös mitotisesti jakautuneiden solujen määrä väheni huomattavasti näkökentässä, mutta morfologisia muutoksia ei havaittu. Kaivoissa, joissa oli MCF-7 ja Caco-2-soluja 1 ja 500 ug / ml, havaittiin kasvun hidasta hidastumista verrokkiin verrattuna. Koekuvioissa, joiden konsentraatio oli 12,5, 25, 50 ja 250 pg / ml, ei havaittu eroja verrattuna kontrolliryhmään K.

96 tunnin viljelyn jälkeen MCF-7: ssä ja Caco-2-soluissa pitoisuuksissa 2, 1 ja 500 ug / ml havaittiin alan näkökulmasta vähemmän lisääntyviä pesäkkeitä ja vähemmän soluja vertailuryhmän pesäkkeisiin verrattuna. Morfologiset muutokset havaittiin MCF-7-soluissa vain suurimmalla pitoisuudella 2 mg / ml. Tässä kokeellisessa ryhmässä nähdään yksittäisiä pesäkkeitä, joissa soluja havaittiin ilman selkeitä ja selkeitä muotoja, joilla oli tyypillinen kuvio. Mitotisesti jakautuneiden solujen määrä näkökentässä pienenee. Samalla ympäristössä oleva detritus oli poissa.

Kokeen päätyttyä 96 h: n jälkeen solut trypsinoitui, tuloksena oleva solususpensio värjättiin 0,4% trypaanin sinisellä liuoksella ja solujen lukumäärä laskettiin Goryaev-kammiossa. Solulaskennan tulokset on esitetty taulukossa 1.

Taulukossa 1 esitetyistä tiedoista seuraa, että T. caniksen tutkittu uute ei vaikuttanut merkittävästi elinkykyisten Caco-2-solujen lukumäärään 96 tunnin inkubaation jälkeen. Siten ihmisen paksusuolen elinkykyisten solujen lukumäärä oli 2, 1 ja 500 pg / ml pitoisuuksina 90,0, 88,5 ja 88%, mikä on verrattavissa solujen kontrolliryhmään, jossa elinkelpoisuus on 96%. Samaan aikaan samoilla konsentraatioarvoilla havaittiin merkittävää laskua solujen kokonaismääränä vertailuryhmään verrattuna. Niinpä Caco-2-solujen kokonaismäärä kontrolliryhmässä 96 tunnin viljelyn jälkeen oli 116,7 x 10 3 solua / kuoppa ja arvot olivat 500, 1 ja 2 mg / ml arvot olivat 72,0 x 10 3, 63,3 x 10 3 ja 65,9 x 10 3 solua / kuoppa, vastaavasti. Ekstraktipitoisuuksina 12,5 - 250 ug / ml kokonaissolumäärät ovat vertailukelpoisia kontrolliryhmään ja vaihtelivat 94,0 x 10 3 - 106,0 x 10 3 solua / kuoppa. Tämän perusteella voidaan päätellä, että T. canis -uutteen suuret pitoisuudet 500 - 2 mg / ml estävät Caco-2-kasvainsolujen proliferaatiotoimintaa.

Kun verrataan saatuja tuloksia (taulukko 1) vaikutuksen uutetta T. canis kulttuuri kasvainsolujen ihmisen rinta- ja ihmisen paksusuolen voidaan olettaa, että MCF-7-solut ovat herkempiä haitallinen vaikutus testiaineen. Siten taulukon 1, että elävien solujen lukumäärä MCF-7 vähitellen laski 95,2%: sta vähintään annoksena 12,5-79,5% enintään 2 mg / ml, verrataan viitearvoon 96,8 %. Lievä inhiboiva vaikutus koeuutteen proliferatiiviseen aktiivisuuteen MCF-7-solujen ilmeni jo pitoisuutena 50 ug / ml, jossa solujen kokonaismäärä oli 151,9 x 10 päivänä maaliskuuta solua / kuoppa, verrattuna viitearvoon 181,3 x päivänä maaliskuuta 10 solua / hyvin. Konsentraation kasvaessa 100 ug / ml tai suurempi inhiboiva vaikutus on parannettu suhteessa uutteen konsentroiminen ja maksimaalinen arvot 2 mg / ml, jos solujen kokonaismäärä väheni kolme kertaa verrattuna kontrolliin ja oli 60,0 x päivänä maaliskuuta 10 solua / kuoppa.

Tässä asiakirjassa saatujen tulosten perusteella voimme päätellä seuraavaa.

T. caniksen tutkittu uute on voimakkaasti antiproliferatiivinen vaikutus MCF-7-soluihin pitoisuuksina 100, 250, 500, 1 ja 2 mg / ml, mikä ilmenee 96 tunnin inkuboinnissa.

2. Uutteen vaikutus MCF-7-soluihin riippuu annoksesta.

3. T. canin -uutteen inhiboiva vaikutus Caco-2-soluviljelmän proliferatiiviseen aktiivisuuteen ilmenee vähäisemmässä määrin suuremmissa pitoisuuksissa 500, 1 ja 2 mg / ml.

4. MCF-7-soluviljelmällä on suurempi herkkyys T. canis -uutteen antiproliferatiiviselle vaikutukselle verrattuna Caco-2-soluihin in vitro -mallissa 96 tunnin viljelyn jälkeen.

1. Kang Y.J., Jo Jo, Cho M.K. et ai. Thrichinella spiralis -infektion, kasvaimen kasvun ja B16-F10-melanoomasolujen metastaasin, Vet. Parasitol. - 2013. - V. 196 (1-2). - s. 106-113.

Molinari J.A., Ebersole J.L. Pitkäkestoisen Trichinella spiralis -infektion antineoplastiset vaikutukset B-16-melanooniin // Int. Arch. Allergia Appl. Immunol. - 1977. - V. 55 (1-4). - s. 444-448.

3. Pocock, D., Meerovitch, E., Trichinelloosin anti-neoplastinen vaikutus syngeeniseen hiirimalliin, Parasitology. - 1982. - V. 84 (Pt. 3). - s. 463 - 473.

4. Vasilev S., Ilic N., Gruden-Movsesijan A. et ai. Nektori ja apoptoosi Trichinella-spiralis-välitteisessä kasvaimen vähentämisessä // Cent. Eur. J. Immunology. - 2015. - V. 40 (1). S. 42 - 53.

5. Wang X.L., Fu B.Q., Yang S.J. et ai. Trichinella spiralis - potentiaalinen kasvainten vastainen aine // Vet. Parasitol. - 2009. - V. 159 (3-4). - s. 249-252.

6. Wang X.L., Liu M.Y., Sun S.M. et ai. Trichinella spiralis tuottaa kasvaimen vastaisen proteiinin apoptoosin ihmisen hepatooma H7402-soluissa // Vet. Parasitol. - 2013. - V. 194 (2-4). - s. 186-188.

1. aine, on antiproliferatiivista aktiivisuutta, joka on proteiini, uute Toxocara canis, joka on saatu uuttamalla gomogentata loismatoja T. Canis fosfaatilla puskuroitua suolaliuosta, pH 7,2 suhteessa 1:10 ja 36-48 tunnin ajan 4 ° C: ssa, ja sentrifugoimalla.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen aine, tunnettu siitä, että sillä on antiproliferatiivinen aktiivisuus ihmisen kasvainsolumomalleilla in vitro.

Antiproliferatiivinen vaikutus on

Jotkut toiminnot perustuvat interferonien antiproliferatiivinen vaikutus. Suurin osa interferonien anti-infektiivisen aktiivisuuden komponenteista on yksi tai toinen rooli niiden antitumoraalisessa vaikutuksessa.

Mainittu kasvu Mx-proteiinien synteesi, jotka estävät mRNA: n transkription entsyymien 2'-5'-oligoadenylaattisyntetaasi järjestelmä, translaatio estettäisiin tarvitaan synteesiä solun proteiinien, tryptofaani intrasellulaaristen varastojen tyhjenemisestä, mikä johtaa häiriöiden proteiinisynteesin solussa, on suuri merkitys antiproliferatiivinen, mukaan lukien kasvaimia, interferonit teko.

2'-5'-syntetaasin tason muutoksen arvo vuonna 2000 IFN-a: n antiproliferatiivinen vaikutus jotka on vahvistettu kliinisissä havainnoissa: entsyymitason kasvun asteen korrelaatio hoidon tehokkuuden kanssa potilailla, joilla on suoliston karsinoidi ja lymfoomat.

Ei vähempää antiproliferatiivisessa vaikutuksessa interferoni on toinen mekanismi. Solun ytimeen lähetetty signaali, joka johtuu interferonin sitoutumisesta interferonireseptoriin, vähentää solukasvun säätelyyn osallistuvien proto-onkogeenien, erityisesti c-tus ja c-fos, ilmentymistä.

Näiden torjuminen esisyöpägeenien johtaa solusyklin estämiseen, solujen kerääntymiseen G0-vaiheessa, minkä seurauksena proliferaatio hidastuu tai jopa pysähtyy, koska useimmat solut läpäisevät apoptoosin. Tämä prosessi on palautuva, ja jonkin ajan kuluttua poistamisen jälkeen interferoni soluproliferaation voi palauttaa tempo, ilmentymisen onkogeenien, tukahdutettu läsnä ollessa interferoni, sen jälkeen kun sen poistamiseksi rungosta voidaan myös palauttaa takaisin edelliselle tasolle.

Samoin toiminta interferonit useimmissa tapauksissa ei aiheuta peruuttamattomia prosesseja soluissa, joiden genotyyppiä muutetaan viruksen genomin integroimiseksi solun DNA: han. Interferonin pitkäaikainen käyttö näissä tapauksissa voi palauttaa solujen normaalin fenotyypin, mutta interferonin toiminnan lopettaminen johtaa jälleen kasvaimen kehittymiseen.

Tärkeää antiproliferatiivisia, erityisesti, kasvaimia, interferonit toiminta on angiogeneesin inhibitiota - kasvun ja uusien verisuonten muodostumiseen, on tärkeä rooli kasvun ja tuumori. Lukuisat tutkimukset, joissa tutkitaan terapeuttinen vaikutusmekanismi IFN-a on haemangiomatosis osoitti, että interferonit estävät endoteelisolujen lisääntymistä ja sileitä lihassoluja, estävät fibroblastikasvutekijä ja angiogeniini (kasvutekijä ja verisuonten kasvaimet), vähentää kollageenin tuotantoa.

Osoitetaan, että IL-12, jolla on voimakas angiogeeninen vaikutus, lisää IFN-y: n ja sen efektoriproteiinin p10 muodostumista.

Terveille soluviljelmille avunantajat ja akuutti leukemiapotilaat osoittivat, että IFN-a tukahduttaa merkittävästi telomeraasin aktiivisuutta - entsyymiä, joka säätelee telomereiden pituutta, mikä on välttämätöntä solujaolle. On varmistettu toistuvasti, että IFN-y lisää FAS-antigeenin ja kaspaasin 3 ekspressiota ja indusoi siten apoptoosia luuytimen (CD34 +) esiasteissa.

Tiedot saatiin Samoin IFN-a, ja sen apoptoottisen vaikutuksen teho paranee sen aiheuttaman anti-apoptoottisen molekyylin Bax fragmentaatiolla. IFN-a kasvattaa myös tuumorinekroositekijän vapautumista veren sisään, jonka vaikutus kohdistuu tuumorisolujen hajoamiseen.

Näin ollen tähän mennessä saatavilla olevista tiedoista on selvää, että interferonit on antiproliferatiivinen, mukaan lukien kasvainten vastainen, vaikutus, toteutettu useilla usein toisiinsa liitetyillä tavoilla. Antituumorivaikutuksen interferonit ovat tärkeitä, kuten on esitetty menetelmiä suoria vaikutuksia kasvaimen, ja epäsuora kasvaimia mekanismien toiminnan lisääntyminen makrofagien, T-solujen aktivaatio, luonnollisten tappajasolujen ja lisääntynyt vasta-aineen tuotanto.

Antiproliferatiivinen vaikutus on

Epidemiologian ja mikrobiologian instituutti. NF Gamalei RAMS, Moskova

Antiproliferatiivinen vaikutus

Erittäin herkkä AP-vaikutuksille tuumorisoluille, joille on ominaista jatkuva kontrolloimaton kasvu, joten AP-vaikutus antoi toivoa IFN: n kasvainten vastaiselle aktiivisuudelle. Useat satoja tutkijoita ovat tutkineet tätä ongelmaa, usein yhdistämällä nämä kaksi käsitystä, mikä on kliinisesti virheellinen.

Kun IFN: tä käytetään suurina annoksina (> 1 miljoonaa IU), AP-vaikutus ilmaistaan ​​ensisijaisesti sytopeniksessä. Hematopoieettisen järjestelmän solut ovat erittäin herkkiä IFN: lle. Samanaikaisesti sekä kasvua että kykyä siirtokuntaan luuytimessä ja pernassa tukahdutetaan. Mitogeenin stimuloitujen lymfosyyttien tukahduttaminen ja lisääntyminen. Lymfoidisarja on pääsääntöisesti herkempi IFN: lle kuin myeloidille. Vähiten vaikuttaa IFN-erytropoieesia.

Kuitenkin, IFN käytetään korkean päivittäisinä annoksina (3-15 MIU), aiheutti solujen vähentäminen (vähentämällä verenkierrossa kasvaimen leukosyyttien) keskimääräisestä 9 97,4x10 4,2x10 9 / l koon pienentyessä pernan [28] potilailla krooninen myelooinen leukemia. Vaikutus oli riippuvainen käytetyt annokset lääkkeen (eli saavutetaan kustannuksella AP-vaikutus), vaan saavuttaa antituumorivaikutuksen ja tarvittavan paranemisen lisätoimenpiteitä, mukaan lukien luuydinsiirron.

AP-vaikutus on palautuva. IFN: n lopettamisen jälkeen hematopoieesi on täysin palautunut. Kasvainsolujen kasvu myös uudistuu. Jotta AP-vaikutus pysyisi kehossa, on välttämätöntä antaa jatkuvasti suuria IFN-annoksia.

AP vaikutus on ehdottomasti liittyy aktivoinnin 2', 5'-oligo (A) syntetaasi, kuten eri kulttuureissa päällekkäisyyden välillä Layer 2', 5'-oligoadenylates sytoplasmassa ja estämisen astetta proliferaation. Tämä suhde on vielä epäselvä. Ei ole epäilystäkään siitä, että AB: n ja AP: n kehittämisen molekylaarimekanismit tulevat myöhemmässä vaiheessa näyttämään olevan erilaisia. Esimerkiksi koleratoksiini, muuttamalla fysikaalis-kemiallisen tilan solukalvon ja cAMP-taso inhiboi AB-tilassa, mutta ei AP-vaikutuksia [29]. Samanlainen vaikutus on oubain, puromysiini ja sykloheksimidi tietyissä pitoisuuksissa.

Kehon muskuloktaanisten, mesenkymaalisten ja epiteelisten kudosten solut ovat yleensä resistenttejä IFN: n AP-vaikutukselle. Herkimpi malli, jota käytetään AP-vaikutuksen mittaamiseen, on Daudi-linjan muunnetut B-lymfosyytit, jotka on eristetty Burkittin lymfooman potilaista. Retrospektiivisessä analyysissä voidaan päätellä, että aktiivisin antiproliferatiivinen potentiaali on IFN-a. Se on usein 10-20 kertaa tehokkaampi kuin IFN-s. IFN- ja IFN-aktiivisuus vaihtelee riippuen solutyypistä, mutta useammin IFN: llä on etuja iho-lihaskudoksen soluille. Antiproliferatiivisen potentiaalin osalta IFN-sarja on voimassa: IFN-> IFN-> IFN-. Tässä tapauksessa on muistettava, että AP-vaikutus on yhteinen kaikille IFN: lle ja se ilmenee aina kliinisesti, kun sitä käytetään suurina annoksina. Koska kliininen oireyhtymä on tavallisesti reversiibeli sytopenia, on suositeltavaa käyttää IFN: tä päivittäisinä annoksina> 1 miljoonaa IU hematopoieettisilla aktivaattoreilla, esimerkiksi leukinferonilla.

AP-vaikutus ilmenee vain IFN: n vuorovaikutuksessa spesifisten reseptorien kanssa, mitä seuraa makromolekyylien synteesin syvällinen rikkominen. Niiden solujen mutantit, jotka ovat menettäneet reseptorin, saavat resistenssin sekä antiviraalisille että antiproliferatiivisille vaikutuksille. On myös pidettävä mielessä, että anti-proliferatiivinen vaikutus pienillä annoksilla on sytostaattinen luonne: solujen kasvu on täysin palautettu poistamisen jälkeen IFN, mutta tämä vie aikaa - ainakin 24 tunnin ajan [30, 31].

Monien havaintojen [32] tarkastelun perusteella voidaan päätellä, että IFN: n antiproliferatiivinen vaikutus on erityisen voimakas valmisteluvaiheessa (vaihe G0, G1, G2), joten solut, joilla on lyhyt ajanjakso ja DNA-synteesi (S-jaksot) ovat voimakkaita tai jotka ovat mitogeenivaiheessa (M-faasi), ovat vähemmän herkkiä.

On tunnettua, että 2'-5'-oligoadenylaattien perustaso on proliferaatiossa tarvittavassa sytoplasmassa. Kuitenkin kun IFN: ää annetaan useimmissa kudoksissa, niiden taso voi nousta 10-15 kertaa. Näin ollen hiiret, jotka saivat IFN / jo jälkeen 2-5 tunnin alkaa nousta tasolle 2', 5'-oligoadenylates pernassa, keuhkoissa, maksassa ja vähemmässä määrin kateenkorva, ja aivot [33]. Näin ollen, esimerkiksi, että Daudi-solujen sytoplasmassa, uusien proteiinien, joiden molekyylipainot ovat 15, 16, 20, 53, 79, 87 ja 105 kDa: n ja alentuneen ainoastaan ​​yhden proteiinin - 23 kD. Samaan linjan AP-toiminta-mutanttisoluihin vastustuskykyisesti vain yksi proteiini - 15 kDa - ei selvästikään ole indusoitu. Muiden proteiinien taso on merkittävästi vähentynyt, mutta niitä löytyy edelleen. Samanaikaisesti solun proto-onkogeenin c-myc: n ilmentyminen estyi myös IFN: llä [34].

Nyt tiedetään, että ihmisen genomi on noin 40 solun proto-onkogeenien, jotka on ilmaistu ainoastaan ​​alkion soluissa, mutta vähemmän aktiivinen kypsä. Julkaistujen tietojen, esimerkiksi Xenopus laevis aikana munasolun kypsymisen kukin niistä kertyy 8000000 geenin kopioita, joissa on-myc, kypsillä munat vaiheessa taso pysyi erittäin korkea - 5000000 yksikköä, mutta sitten hedelmöityksen jälkeen ne jaetaan fissioreaktiossa ja kukin tadopolisolu sisältää vain 20-50 kopiota c-myc: stä, so. suunnilleen sama kuin henkilö.

Ihmisen genomissa c-myc kypsissä soluissa on vähän ilmaistu. Kuitenkin alkionkehityksen, sekä kirurgisissa toimenpiteissä, palautuminen ja korvaukseen muita prosesseja genesis aktivointi tapahtuu-myc ja muut onkogeenien kasvu c-ras ja c-abl. Nämä protoonkogeenit ovat ehdottoman välttämättömiä proliferaation aloittamiseksi. Kasvun proto-onkogeenien aktivaatio stimuloi soluja siirtymään vaiheesta G0/ G1 solukierron myöhempiin vaiheisiin - S, G2 ja mitosi (M). Kuitenkin kudoksen kasvu on geneettisesti määritelty ja tiukasti kontrolloitu kasvutekijöiden, kontaktisuonien, apoptoosien [22] mukaan. Proto-onkogeenien kasvun tärkein säätelijä on p53-proteiini, jonka geeni on laajasti edustettu nisäkkäiden genomissa.

Solujen hematopoieettisen järjestelmän p53-geenin johtaa fysiologinen ilmiö - ohjelmoitu kuolema - apoptoosin. Estää tämän proteiinin bcl-2-geenistä. Näin ollen, lisääntynyt ilmentyminen proto kasvu luo edellytykset hallitsemattoman kasvun ja pahanlaatuisten kasvainten (erityisesti pistemutaatioista, transformoiva proto-onkogeenin muuttuu onkogeeniksi, tai kun sisällytetään viruksen genomiin ja viruksen tehostajaa vaikutus). Vähentää niiden ekspressiota IFN-vaikutuksen tai p53 (mukana proteiinia ja Rb, jota ei käsitellä tässä) estää niiden kasvun ja leviämisen. Mutta tietenkin nämä prosessit eivät rajoitu niihin, itse asiassa ne ovat paljon monimutkaisempia.

Tuumorimuutoksella tulisi esiintyä c-myc: n ja muiden kasvu-onkogeenien aktivaatiota. On mielenkiintoista, että onkogeenien transformoidun fenotyyppisen vakio-ilmentymisen ja tuloksena olevan onkoproteiinien läsnäolon ylläpitäminen sytoplasmassa on välttämätöntä. Johdatus onkopoproteiinien normaaliin soluun johtaa transformoitumisen fenotyyppisten merkkien ilmenemiseen, jotka alkavat katoa, kun onkoproteiinit hajoavat. Vastaavien vasta-aineiden transformoitujen solujen sytoplasmaan vieminen myös onkoproteiineihin johtaa myös fenotyyppisesti normaalien solujen tilapäiseen talteenottoon. Näin ollen, transformoitu solu, joka on menettänyt tiettyjä toimintoja (erilaistuminen), ja tunnettu siitä, että hallitsematon kasvu, tukahduttaminen ekspression onkogeenien kasvun vaikutuksesta IFN voidaan palauttaa normaaliin fenotyyppiin. On erittäin tärkeää tietää jokainen lääkäri.

On olemassa useita tapoja aktivoida solun proto-onkogeenien - pistemutaatioiden, genomin monistamisen, kertyminen transkriptien tai lopuksi translokaatio geenejä on kuvattu krooninen myelooinen leukemia (c-abl-09:22 geeni) tai Burkittin lymfooman (geeni-myc 08:14) [35]. Uusi promoottori vaikuttaa uudelleen siirrettyyn geeniin ja se voidaan aktivoida. Voi olla tärkeä rooli ja onkogeenisten viruksia kuljettavat nämä onkogeenien (yleensä pienin muutoksin) ja voi upottaa ne genomiin. On kuitenkin selvää, että mitä todennäköisimmin pistemutaatiot p53-geeni, joka löytyy ainakin 50% tuumorisolujen, tyypillinen Yhdysvalloissa ja Yhdistyneessä kuningaskunnassa ihmisen kasvaimissa [36]. Oletetaan, että se seikka, että p53-geenin mutaatio, joka vähentää valvoa toiminnan onkogeenien kasvun vain luo edellytykset kasvaimen kasvua. Niiden kliiniset oireet on odotettavissa alueella jopa 30 vuosi, kun mukana, ja muut signaalit tai heikentää mekanismeja antituumorisen immuniteetin.

IFN: n mahdollisuudet estää kasvainten vastaisia ​​prosesseja ovat kiistattomat ainakin vaikuttamalla kasvuun onkogeenien ilmentämisellä. Mutta niitä ei ole tutkittu lainkaan.

Esimerkissä-myc-geenin soluissa Daudi ensin 1984, on osoitettu, että tyypin I IFN voidaan pitää negatiivisen kasvun säätelijä ilmentymisen onkogeenien, joka ainakin osittain voi selittää AP-vaikutus normaaleissa kudoksissa [37]. Myöhemmin tämä vaikutus havaittiin toisen kasvua c-Ha-ras onkogeenin kanssa. Vaikutus toteutuu useimmiten atsokogeenin translaation tasolla (proteiinitaso). Esitetyssä esimerkissä, jossa on-myc, DNA: ta sitova proteiini p62 kDa: n, joka on tuote, jolla on-myc, on tarpeen ligaatiota DNA-fragmenttien yhdeksi kierre Okazaki. Sen tukahduttaminen IFN: n käyttöönoton yhteydessä häiritsee uuden DNA: n synteesiä, jota seuraa proliferaation estyminen.

Kuitenkin muut tunnetut esimerkit tukahduttaa replikaation ilman merkittävää vaikutusta ekspression kasvu proto (monosyyttisolulinja numero I-937, HL-60, Freund erytroleukemia, Balb c / 3T3). Järjestelmä 2', 5'-oligo (A) syntetaasi-RNaasi L voi olla tärkeä rooli tässä prosessissa antamalla nopea hajoaminen juuri syntetisoidun mRNA: tarvitaan proliferaation [38].

Immunomodulaatiotoiminta

Lähes kymmenen vuotta IFN-lääkkeitä on käytetty antiviraalisina aineina, jotka voivat suojata solua virusinfektiosta ilman immuunijärjestelmän vaikutuksia. Vaikka jo useita kliiniset havainnot, kuten stimulaatio korjaava prosesseja haavat, mukaan lukien voimakkaasti tartunnan [39, 40], ja laaja palovammoja [41] ei sovi yleiseen järjestelmään ja tarvitsi uutta ymmärrystä [2].

Suurta kiinnostusta on herättänyt tutkimus kädellisillä Hollantiin, ovat osoittaneet, että apinoilla tartunnan erittäin herkkä IFN rasitusta vacciniavirus tai resistentit mutantit annoksen IFN tuskin saavutettavissa kehossa (> 10 tuhatta. IU), ja niiden myöhempi IFN hoidossa ei havaittu merkittäviä eroja kliinisissä dynamiikka ja jännitteet kehittynyt immuniteettia. Molemmissa tapauksissa IFN estänyt virusvahinkoja. Se viittasi hallitseva rooli immuuniefektoreiden aktivoitua IFN, parhaillaan poistaminen viruksen ja myöhemmän vaiheen kliinisiä elpymistä.

Jälkikäteen voidaan väittää, että ei-spesifisten solujen aktivoituminen immuunireaktioiden ja sääntelyn efektoreina immuunivasteen näyttää olevan - päätehtävä interferonin kehossa [4]. Kun vuorovaikutuksessa patogeenin IFNy tuotettu makrofagit ja lymfosyytit, on tulehdusreaktion, joka johtaa tuhoutumiseen patogeenin tulisija on vähintään normaalin kudoksen vaurioon. On tunnettua, että normaalin terveyden ylläpidetään ensisijaisesti kautta ei-spesifisen solujen immuunivasteita, tunnetulla kolmikko immuuniefektoreiden: makrofagin, auttaja-T-lymfosyyttien ja neutrofiilien fagosyyttijärjestelmässä. Makrofagin tässä tapauksessa nähdään yleinen antigeeniä esittelevien solujen (APC), väittää käsitellyn antigeenin T-soluihin, sekä aktivoivat sytokiinit,. Rooli APC suoritetaan dendriittisolujen ja Langerhansin solut (iho). Mutta ilmiön ydin ei muutu tämän kanssa. APC esittää käsitellyt antigeenin kanssa kompleksoituneen MHC-kompleksin (MHC) luokan 2 (viruksen ja kasvaimen antigeenejä monimutkainen MHC-luokan 1), joka on tunnistaa T-solureseptori (TCR) CLE + lymfosyyteillä. On tunnettua, että immunogeenisyys käsitellyn antigeenin kasvoi noin 10000 kertaa, ja 100 antigeenin + MHC-luokan 2 voivat olla vuorovaikutuksessa 18000 TCR [42]. Tämä kuvastaa immuunitunnistuksen tehokkuutta.

Antigeenin rooli voidaan suorittaa millä tahansa taudinaiheuttajalla, joka ensin tapetaan peroksidikyllästysreaktioilla, sitten sisäistetään. Epäspesifisen vasteen myöhempiä reaktioita on esitetty kuviossa 3. 1. Antigeenin vaikutuksen alaisena makrofagi on aktivoitava tuottaen autokriinisen INF-a: n ja IL-6: n. MHC-luokan 2 antigeenit pysyvät makrofagissa eivät esiinny ja IFN-a ja IL-4 stimuloivat niiden ulkonäköä. Menetelmää tukahduttaa TGF: n transformoiva kasvutekijä, joka voi myös tuottaa makrofagit. IFN: n lähde on aina aktivoitu T-lymfosyyttejä.

Makrofagin ja T-helper-lymfosyytin suoraa kontaktia antigeenin + MHC-luokan 2 ja TCR-rakenteiden kautta täydennetään myös transmembraanisten glykoproteiinien ICAM kanssa. Tämä mahdollistaa immuunivasteen rajoittamisen, mutta ei riitä aktivoimaan T-lymfosyyttejä. Edellyttää, että toinen signaalin monimutkainen sytokiini, jota tuottavat aktivoidut makrofagit: se ensinnäkin IFN-a ja IL-1, IL-6, IL-12, TNF, jotka ovat vuorovaikutuksessa vastaavien-reseptoriin T-auttajasolujen.

Aktivoitujen T-auttaja-lymfosyyttien, säilyttäen makrofagit väliaineeseen vapautunut sytokiinien, kuten IFN (stimuloiva MHC luokka 2) ja IL-4 (aktivoimiseksi MHC-luokka 1-geenien), ja LIF MIF säilyttää makrofagien tulehdus ja pesäkkeitä (CSF) - M-CSF ja GM-CSF. Koska keskinäinen vaikutus tasapainottavat aktivoidut makrofagit ja T-auttaja-lymfosyyttien aktivaation tila ylläpidetään ja monistamista immuunivasteen aikaan nopeuttamalla erilaistumista varhaisessa makrofaagiesiasteiden monosyyttien / makrofagien.

Signaalit makrofagien (IFN, IL-1, TNF, IL-8, G-CSF ja GM-CSF) ja auttaja-T-lymfosyyttien (IFN, IL-3) koettu neutrofiilisten fagosyyttien, edistää niiden erilaistumista, stimuloiva fagosytoottiseksi toiminto. Tässä tapauksessa kaikki parametrit lisääntynyt fagosytoosi - määrää kypsän liuskatumaisten neutrofiilien, sukupolven peroksidit, fagosyyttisen indeksin ja numero, ja (ennen kaikkea) täydellisyyden fagosytoosin. Voit sanoa, että tämä ympyrä sulkeutuu.

Koko negatiivisen signaalin koko järjestelmälle on IL-10, jota molemmat makrofagit ja T-lymfosyytit voivat tuottaa. Mutta tärkein sääntelytehtijä tässä prosessissa kuuluu ilmeisesti T-lymfosyytteihin. Spesifiset vasta-aineet näissä reaktioissa eivät saa osallistua.

Kokonaisuudessaan solureaktioissa antigeenin poistamiseksi, joihin liittyy makrofagien (tai muut APC: t), T-lymfosyyttien ja liuskatumaisten fagosyytit, jossa ei ole tarvetta lisääntymistä ja erilaistumista T-lymfosyyttien voidaan pitää ensimmäisen vaiheen immuunivasteen. Se liittyy läheisesti seuraavat - toisen vaiheen, joka alkaa tasolla lisääntyvien T-lymfosyyttien ja määrittää pääsuunta seuraavissa reaktioissa organismin patogeenin kun sisällytetty ensimmäiseen soluun (erityisesti DTH), tai humoraalisen immunogenesis polku.

Immuunivasteen ensimmäinen vaihe toimii jatkuvasti ja on ilmeisesti tärkein välittömän reaktion organismin kanssa matala kuormitus patogeenistä. Se aktivoituu välittömästi antigeenin tunnistamisen jälkeen. Sen osallistujat ovat immuuni-efektoreja, jotka ovat eriytyneet tähän hetkeen, mutta toisaalta se luo perustan tuleville immuunireaktioille. Immuunivasteen ensimmäisen vaiheen reaktioiden suojaava rooli on poikkeuksellisen korkea ja lääkäri ilmeisesti aliarvioi sen.

Kirjaudu tilillesi

Moiseyev, Cand. vet. Sciences, LLC "BIOTECH-PHARM", Pietari

PI Baryshnikov, tohtori Veteraani. Sci., Professori, Altajan maakunnan yliopisto, Barnaul

Sytokiineihin kuuluvat interferonit (jäljempänä - IFN), interleukiinit, kemokiinit, kasvua ja pesäkkeitä stimuloivat tekijät, jotka ovat signalointi-polypeptidimolekyylien immuunijärjestelmän. Jossa on laaja biologisen aktiivisuuden kirjo, ne määritetään paitsi riittävää immuunivastetta, mutta myös säädellä vuorovaikutusta päärungon integroivien järjestelmien - hermoston, immuunijärjestelmän ja endokriinisen.

Useimpien sytokiinien rakenne ja toiminta-mekanismi ovat täysin ominaisia. Geenitekniikan tekniikoiden ja modernin biotekniikan käytön ansiosta monet sytokiinit tuotetaan nykyään rekombinanttisten lääkkeiden muodossa, jotka ovat identtisiä endogeenisten molekyylien kanssa riittävään määrään kliiniseen käyttöön.

Monet mikro-organismit - bakteerit, hiivat, virukset - käytetään ulkomaisen perintöaineksen vastaanottajina rekombinanttisten kantojen hankkimiseksi - bioteknologisten tuotteiden tuottajille. Siten on saatu rekombinantteja E. coli -kantoja, jotka tuottavat interferoneja, insuliinia, kasvuhormoneja, erilaisia ​​antigeenejä; B. subtiliksen tuottajat, jotka tuottavat interferonia; hiiva, joka tuottaa interleukiineja jne.

Rekombinanttisten sytokiinien käyttö, jotka tarjoavat riittävän ja kohdennetun immuunihäiriöiden lääkekorjauksen, lisää immunoterapian ja hoidon tehokkuutta yleensä. Syöttään kehoon, sytokiinit täyttävät endogeenisten säätelymolekyylien puutteen ja täydentävät niiden vaikutuksia kokonaan. Tämä on erityisen tärkeää vakavan tai kroonisen patologian olosuhteissa, kun perinteisten immunomodulaattorien tai sytokiinien synteesin induktoreiden käyttö on hyödytöntä, koska immuunijärjestelmän kompensointivalmiudet vähenevät. Tällä hetkellä rekombinanttinen sytokiinihoito on yksi lupaavimmista ja jatkuvasti laajenevista immunofarmakologian alueista.

Niinpä antiviraalista ja antiproliferatiivista vaikutusta esiintyy ensimmäisen tyypin interferoneilla (tästä eteenpäin - IFN-a, IFN-p). Erityinen paikka nykyaikaisten ideoiden valossa immuunivas- teiden molekyylimekanismeista kuuluu interferoni-gammaan (jäljempänä "IFN-y") - immuunivasteen säätelevä sytokiini.

Rekombinanttien interferonien perusteella useat yritykset ovat kehittäneet eläimille ja ihmisille tarkoitettuja lääkkeitä, joita käytetään infektiosairauksien, ensisijaisesti viruksen etiologian, hoitoon ja ehkäisyyn.

IFN eläimillä ja ihmisillä hoitoon ja ehkäisyyn sairauksien eri etiologian riittävä ja kohdennettua huumeiden korjaus immuunitoimintahäiriöitä täydennystä puutteellinen endogeenisen säätelymolekyyleja ja toistavat niiden vaikutuksia. Korkea hyötysuhde immunokorrigirujushchaja, ennustettavuus ja selektiivisyys niiden toiminnan vuoksi spesifisten reseptorien soluissa ja että on olemassa luonnollinen mekanismeja niiden poistamiseksi. Farmaseuttiset formulaatiot, jotka perustuvat yhdistelmä-DNA-IFN-ovat tehokkaita taudinaiheuttajien ja niillä immuuni-hoito suorana korvikkeena toiminta, ja käyttää erilaisia ​​induktiivisia vaikutuksia. Tällä hetkellä niitä käytetään laajalti tarttuvien, onkologisten ja tiettyjen muiden eläintautien hoitoon.

Interferonien luokitus

Interferonit (IFN: n, IFN) - yhteinen nimi, jolla nyt yhdistetty määrä biologisesti aktiivisia proteiineja tai glykoproteiineja, joilla on samanlaisia ​​ominaisuuksia, jotka on syntetisoitu solut prosessi suojaavan reaktion vasteena hyökkäyksen etäagenttien - virusinfektion tai altistus antigeenille. Interferonien ansiosta solut tulevat immuuni virukseen.

Interferonit ovat useiden funktionaalisten indusoitujen sytokiinien monigeeninen perhe, mukaan lukien antiviraalinen, antiproliferatiivinen, kasvainten vastainen ja immunomoduloiva.

Tällä hetkellä tunnetaan yli 20 IFN: ää, jotka eroavat rakenteesta, biologisista ominaisuuksista ja vallitsevasta toimintatavasta. IFN on jaettu kolmeen tyyppiin:

• Tyyppi I, tunnettu virus interferoni, mukaan lukien IFN-α (leukosyytti, syntetisoitiin aktivoidut monosyytit ja B-lymfosyytit), IFN-β (fibroblastin syntetisoida fibroblastit, epiteelisolut ja makrofagit) ja muut IFN. Ensimmäinen tyyppi (IFN-α: n, IFN-β) pääasiassa luontainen antiviraalisia ja antiproliferatiivisia vaikutuksia, vähemmässä määrin - immunomodulatorisia. Ne on tuotettu heti kokouksen patogeenin - indusoitu prosessi virusinfektion, ja niiden toiminta on suunnattu lokalisointi patogeenin ja sen leviämisen estämiseksi kehossa. Indusoijat IFN-α ja -β ovat virukset, RNA: n (erityisesti kaksijuosteinen), lipopolysakkaridit (LPS), jotkin komponentit bakteerit. Virusten joukossa tehokkaimmat interferoni-induktorit ovat RNA: n genominen. DNA: ta sisältävät virukset ovat heikkoja induktoreita (poxviruksia lukuunottamatta).

• Tyyppi II, eli immuuni, sisältää IFN-y: n (aktivoitujen T-lymfosyyttien ja NK-solujen syntetisoimiseksi). Toisen tyypin (IFN-y) interferonien pääasiallinen vaikutus on osallistuminen immuniteettireaktioihin. Hän alkaa syntyä myöhemmissä vaiheissa infektioprosessi on herkistynyt T-lymfosyyttejä ja on aktiivisesti mukana kaskadin spesifisen immuunivasteen. IFN-y-tuotannon aikaansaavat interferonogeeniset aineet, antigeenit, T-mitogeenit ja jotkut sytokiinit kykenevät. Kohdesoluja toiminnan IFN-γ ovat makrofagit, neutrofiilit, luonnolliset tappajasolut, sytotoksiset T-lymfosyytit, joilla on pinnallaan reseptoreita IFN-γ-IFN-γ tuotanto ohjataan sytokiinien. IL-12 ja IL-18 parantaa sen ilmentymistä, ja IL-2 auttaa toteuttamaan toiminto CD4 + -lymfosyyttien aktivoimalla IFN-γ. Tausta IFN-γ on aina olemassa kehossa, vaikka on infektio, esimerkiksi, analyysi interferoni tila näyttää terveillä ihmisillä ja eläimillä aina havaittava määrä IFN veressä, se lisää monta kertaa stimulaation aikana tai infektion. Kuitenkin, jos herpesvirus ja loppuvaiheessa kasvaimen määrä IFN-γ pyrkii nollaan kun herpes virus ja syövän solut tuottavat proteiineja, jotka estävät synteesi IFN-γ. Siksi herpesvirustartuntaan ja syövän interferoni indusoijia merkityksettömiä, ne on annettava ulkopuolelta.

• Tyyppi III löydettiin myöhemmin, tyyppi I ja tyyppi II; tiedot siitä osoittavat IFN-tyypin III tärkeyden tietyissä virusinfektioissa.

Viral interferonit (IFN-α / β) indusoi aikana virusinfektioiden, ja synteesi tyypin II interferonin (IFN-γ) mitogeenisen tai antigeeniärsykkeille. Useimmat viruksen infektoidut solut voivat syntetisoida IFN-a / p: tä soluviljelmässä. Sitä vastoin IFN-y syntetisoidaan vain tietyt immuunijärjestelmän solut, mukaan lukien luonnolliset tappaja (NK) -solut, CD4-T-solut ja CDS-sytotoksiset suppressorisolut.

Interferonien antiviraalinen vaikutus

Interferonit eivät toimi suoraan viruksella. Vaikutuksensa aikana solu tarttuu infektioihin. Interferonit ovat ensimmäinen virusvasta-infektion linja, koska ne alkavat tuottaa välittömästi virusaltistuksen jälkeen. Tässä tapauksessa vasteen vakavuus on suoraan verrannollinen tarttuvaan annokseen.

Jotkut virukset voivat estää IFN: n antiviraalisen vaikutuksen. Adenovirukset tuottavat esimerkiksi spesifisen RNA: n, joka estää proteiinikinaasin aktivaation.

IFN: n sitoutuminen reseptoriin indusoi kolme samanaikaista prosessia solussa, joka päättyy:

• latentin endoribonukleaasin aktivaatio, joka johtaa viruksen RNA: n tuhoamiseen;

• virusmatriisin RNA-synteesi;

• viruskuoren proteiinien synteesin poistaminen.

Nämä mekanismit integroivat antiviraalisen vaikutuksen integraalisesti, mikä johtaa viruksen replikaation tukahduttamiseen.

Interferonien immunomodulatorinen vaikutus

IFN ei vain niillä antiviraalista, immunomoduloivia toimintaa, mutta myös siitä, että vaikutus ekspressioon major histocompatibility complex-reseptori (MHC). IFN-molekyylien ekspression lisäämiseksi luokan 1 MHC kaikissa solutyypeissä, mikä parantaa tunnustamista infektoitujen solujen sytotoksisten T-lymfosyyttien (CTL). Lisäksi, IFN-γ parantaa käsittelyn molekyyli- luokan 2 MHC antigeeniä esittelevien solujen, mikä parantaa esitys viruksen antigeenien CD4 + lymfosyyttien ja luonnollisten tappajasolujen (NK-solut) on aktivoitu. IFN myös stimuloi fagosytoosia.

Sääntely immuunivasteen sytokiinit, interferonit mukaan lukien, menee eteenpäin periaatteen, vaikutus sytokiinin soluun se aiheuttaa muiden sytokiinien muodostumista (sytokiinikaskadin).

Interferonien antiproliferatiivinen vaikutus

IFN: n antiproliferatiivinen vaikutus selitetään seuraavilla mekanismeilla:

• sytotoksisten solujen aktivaatio;

• tuumoriin liittyvien antigeenien lisääntynyt ilmentyminen;

• vasta-ainetuotannon modulaatio;

• kasvainten kasvutekijöiden esto;

• tuumorisolun RNA: n ja proteiinien synteesin inhibitio;

• hidastetaan solusykliä siirtymällä lepäävään vaiheeseen;

• tuumorisolujen stimulointi kypsyttämiseksi;

• ennaltaehkäisevän estämisen palauttaminen;

• uusien kasvien muodostumisen estäminen kasvaimessa;

• sytostaattisen aktiivisuuden biomodulaatio: metabolian muutokset ja vähentynyt puhdistuma;

• huumeidenkestävyyden voittaminen estämällä useita lääkkeen vastusgeenejä.

Interferonien antibakteerinen vaikutus

Viime vuosina on osoitettu, että IFN: llä on myös antibakteerinen vaikutus, joka perustuu IFN: n kykyyn indusoida tiettyjen entsyymien aktiivisuus kyseisessä solussa.

Lisäksi IFN-y: n antibakteerinen rooli aktivoi makrofageja, jotka tuottavat proinflammatorisia sytokiineja, sekä aktiivisia happi- ja typpimuotoja, prostaglandiineja. Nämä tekijät vaikuttavat bakteerien kuolemaan johtaneen tulehdusprosessin kehittymiseen.

Siten kaikki interferonit ovat ryhmä polyfunktionaalisia proteiinitekijöitä, joilla on voimakas antiviraalinen ja kasvaimen vastainen vaikutus vaihtelevasti. IFN-a: lla on voimakkain antiviraalinen aktiivisuus kaikkien interferonien joukossa, ja IFN-y: llä on voimakkaampi antiproliferatiivinen aktiivisuus. Kaikilla interferoneilla on vaihtelevan vakavuuden omaavia immunoregulaattoreita (maksimissa on IFN-y) - lisätään makrofagien, T-lymfosyyttien ja NK-solujen aktiivisuutta.